fisiologia

ORAC: medida do poder antioxidante

Teste de Orac (Capacidade de Absorção Radical de Oxigênio)

O teste ORAC é o método que foi recentemente imposto como uma técnica de referência para medir a ação antioxidante de alimentos e suplementos.

O teste baseia-se na capacidade de um antioxidante para inibir a degradação oxidativa de uma molécula fluorescente causada por radicais peroxil (ROO •). As substâncias fluorescentes mais comumente usadas são beta-ficoeritrina, fluoresceína e pirogalol, que diferem em estabilidade e reatividade. Os radicais peroxil, gerados pela decomposição térmica de um iniciador azocomposto (AAPH), atacam a molécula fluorescente degradando-a, com consequente perda de fluorescência que é medida por um fluorímetro.

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Um antioxidante compete com o substrato constituído pela molécula fluorescente reagindo com os radicais antes que eles possam danificar a própria molécula, inibindo o processo de decaimento da fluorescência. A diferença entre o decaimento da fluorescência na ausência e na presença da molécula antioxidante representa uma medida da capacidade de uma substância para amortecer a reatividade dos radicais livres. A capacidade antioxidante do ORAC é expressa como unidades ORAC, correspondendo a micromoles Trolox® equivalentes por grama de amostra, onde o Trolox® é um composto com atividade antioxidante escolhido como padrão de referência.

O método ORAC é amplamente utilizado como um teste para medir a potência antioxidante, pois fornece medições precisas e repetíveis, com custos aceitáveis. Além disso, pode ser automatizado e aplicado, com modificação do protocolo, a substâncias hidrofílicas e lipofílicas. No entanto, o método também tem limites. Em primeiro lugar, o mecanismo de medição do teste ORAC permite uma avaliação quantitativa da ação antioxidante da molécula, isto é, precisamente quantos radicais livres um antioxidante é capaz de desativar, mas não dá qualquer indicação sobre a velocidade com que isso acontece. A velocidade de inativação dos radicais livres é um parâmetro importante para estabelecer a eficácia de uma substância antioxidante, pois quanto mais rápida a reatividade dos radicais for menor, menor a probabilidade de atacarem as estruturas biológicas causando danos.

Além disso, o valor ORAC de um antioxidante pode variar muito dependendo do protocolo de análise utilizado. Além do método de extração e da temperatura na qual a análise é realizada, a escolha da sonda fluorescente é de grande importância na determinação do resultado final, de modo que as medidas obtidas com diferentes moléculas fluorescentes não são geralmente comparáveis. Portanto, antes de poder comparar os resultados da capacidade antioxidante da ORAC de diferentes substâncias, seria importante conhecer o protocolo, pois somente com o mesmo protocolo analítico os valores são comparáveis.

No entanto, a difusão desse método permitiu determinar a capacidade ORAC de muitos alimentos, em especial frutas e vegetais, com a criação de tabelas de referência, amplamente utilizadas e utilizadas no campo nutricional. A este respeito, o Departamento de Agricultura americano sugere a contratação de cerca de 5.000 unidades ORAC por dia, podendo consumir cerca de cinco porções de frutas e vegetais, para efetivamente neutralizar a atividade dos radicais livres.

É interessante notar que a lista de poder antioxidante de vários alimentos de acordo com a escala ORAC, atualizada para 2010, foi removida do site do USDA; em uma nota, o departamento motiva essa escolha com 1) a escassez de dados clínicos para apoiar a efetiva transferência in vivo de testes antioxidantes realizados in vitro; 2) a ausência de evidências suficientes para acreditar que os efeitos benéficos de alimentos ricos em polifenóis possam ser atribuídos às suas propriedades antioxidantes. Hoje sabemos que as moléculas antioxidantes de origem alimentar têm uma ampla gama de funções, muitas das quais são estranhas à capacidade de absorver os radicais livres. Seu efeito benéfico sobre a saúde, portanto, parece derivar de mecanismos de ação independentes do poder antioxidante.